Kmの計算方法

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著者: Monica Porter
作成日: 20 行進 2021
更新日: 17 5月 2024
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生物学的反応では、酵素は触媒のように機能し、反応が起こる代替経路を提供し、プロセス全体を高速化します。酵素は基質内で機能し、反応の速度を上げる能力は、基質との結合の程度に依存します。 Kで表されるミカエリス定数Mは、酵素/基質親和性の尺度です。値が小さいほど結合が強くなります。つまり、反応は低濃度で最大速度に達します。 KM 基質濃度と同じ単位を持ち、反応の速度が最大値の半分のときの基質濃度に等しい。

ミカエリスメンテンプロット

酵素触媒反応の速度は、基質濃度の関数です。特定の反応のプロットを導き出すために、研究者はさまざまな濃度の基質のサンプルをいくつか用意し、各サンプルの生成物の生成速度を記録します。速度(V)対濃度()のプロットは、急速に上昇し、酵素ができるだけ速く機能している最大速度で水平になる曲線を生成します。これは、飽和プロットまたはミカエリスメンテンプロットと呼ばれます。

Michaelis-Mentenプロットを定義する方程式は次のとおりです。

V =(V最大 )÷(KM +、この方程式は V = V最大 ÷ 2、KM 速度が最大値の半分のときの基質の濃度に等しい。これにより、理論的にはKを読み取ることができますM グラフ外。

Lineweaver-Burkプロット

Kを読むことは可能ですがM Michaelis-Mentenプロットから、それは簡単ではないか、必ずしも正確ではありません。別の方法は、Michaelis-Menten方程式の逆数をプロットすることです。これは(すべての項が再配置された後)です。

1 / V = {KM/(V最大 ×)} +(1 / V最大)

この方程式の形式はy = mx + bです。ここで、

これは、Kを決定するために生化学者が通常使用する方程式ですM。さまざまな濃度の基質を準備し(直線であるため、技術的には2つしか必要ありません)、結果をプロットし、Kを読み取りますM グラフから直接外れます。