希釈からCFUを計算する方法

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著者: John Stephens
作成日: 25 1月 2021
更新日: 11 5月 2024
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CFUはコロニー形成単位の略で、溶液中に存在する細菌の数を定量化するために使用される微生物学用語です。サンプルの濃度に応じて、複数の希釈を行い、異なるサンプルをペトリ皿にプレートする必要があります。バクテリアのコロニーが多すぎる場合、それらを数えることは困難です。少なすぎる場合、サンプルは代表ではない可能性があります。一般に、元の溶液をプレートし、次に1/10希釈(1部溶液、9部生理食塩水)、1/100希釈、場合によっては1/1000希釈をプレートすることをお勧めします。

細菌希釈からのCFUの計算

    細菌が培養されたら、各皿の予備カウントを実行します。通常、1〜2日かかります。個々のコロニーのみをカウントします。コロニーは、別個の孤立したドットであり、一緒に成長した異なるコロニーの塊全体ではありません。これらのコロニーが30以上あり、300未満のプレートを選択します。

    個々のコロニーの数を数えます。これは希釈のCFU番号です。元のサンプルのCFUを決定するには、簡単な計算を実行する必要があります。この例では、46個のコロニーを含む仮想プレートを使用します。

    使用した希釈のサイズを決定します。 (理想的には、事前にペトリ皿にラベルを付けました。)この例では、1 mLの細菌培養物を99 mLの生理食塩水と混合します。これは1/100希釈です。

    実際にプレーティングした量で希釈の程度を掛けます。 0.1 mLの1/100希釈液を寒天にプレーティングした場合、0.1 x 1/100を掛けると、1/1000または0.001になります。

    希釈のCFU(カウントしたコロニーの数)をステップ4の結果で割ります。この例では、46÷1/1000(46 x 1,000と同じ)を計算します。結果は、元のサンプルで46,000 CFUです。