存在する細菌の量を計算する方法

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著者: Laura McKinney
作成日: 2 4月 2021
更新日: 18 11月 2024
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科学者は、連続希釈(一連の1:10希釈)を使用して、細菌培養の人口密度を計算します。少数のバクテリアを含む培養物のドロップをプレーティングしてインキュベートすると、各細胞は理論的には他の細胞から十分に離れて、独自のコロニーを形成します。 (実際には、いくつかのコロニーは近くの2つの細胞の子孫である場合がありますが、これは希薄な培養ではまれであるため、コロニーの数はプレートに最初に移された細胞の数の非常に良い推定値です)不明ですが、適切な数のコロニーを持つ1つのプレートになるために、さまざまな希釈液を使用する必要があります。

連続希釈

    6本の試験管(それぞれ9 mLの増殖培地を含む)に1〜6のラベルを付けます。6本の寒天プレートに1〜6のラベルを付けます。 1。

    よく混合し、ピペッターと滅菌1 mLチップを使用して、1 mLをチューブ1からチューブ2に移します。

    残りのチューブについてステップ2を繰り返します。そのたびに、最近使用したチューブから次のチューブに1 mLを移します。

    ピペット1と滅菌0.1 mLチップを使用して、0.1 mLをチューブ1から寒天プレートに移します。 L字型のガラス棒に炎をあて、それを使って滴をプレートの周りに均等に広げます。使用する細菌に適した温度で、プレートを48時間インキュベートします。バクテリアの種類によって、最適な成長温度が異なります。参照物質を使用して最適な成長温度が見つからない場合は、プレートを25度と37度でインキュベートしてみてください。

    別の試験管から対応するプレートに液体を移すたびに、ステップ4を繰り返します。

人口計算

    6枚のプレートを観察し、30〜200個の孤立したコロニーを持つものを選択します。

    プレート上のコロニーの数に10を掛けて、使用する希釈チューブの培養液1 mLあたりの細胞数を計算します。

    ステップ2の数値に10 ^(プレート番号)を掛けて、元の培養のmLあたりの細胞数を計算します。 10 ^(プレート番号)の値は、そのプレートに接種するために使用される培養の希釈係数です。

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