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DNA、RNA、タンパク質などの生化学研究分子。ブロッティング技術は、科学者がこれらのタイプの分子を分離するために使用するものです。細胞では、それらは混合物として存在します。ブロッティングにより、研究者は、干し草の山の針のように、多くの中から1つのタンパク質を見つけることができます。ブロッティングは通常、DNA、RNA、またはタンパク質の混合物をゲルのスラブに流すことにより行われます。このゲルにより、小さな分子は大きな分子よりも速く移動できます。分離された分子は膜に押し付けられ、分子がゲルから膜に移動するのを助けます。分子は膜に付着しますが、ゲル内にあるかのように、互いに離れた同じ場所に留まります。
ウエスタンブロット
ウエスタンブロッティングは、タンパク質をサイズで分離するための一般的な手法ですが、まっすぐなカラムで行います。これらの並列カラムにより、研究者はボウリングレーンのように互いに隣り合って実行されるさまざまなサンプルでタンパク質の量を比較できます。たとえば、細胞の成長に対する異なる量の薬物の効果をテストしている場合、異なる量の薬物で4つの異なる細胞グループを処理します。次に、セルを開いて、ゲル上の別々のレーンで各グループのタンパク質を実行します。このようにタンパク質を広げることにより、特定のタンパク質に対して薬物の濃度が増加することを確認できます。
ノーザンブロット
RNAの検出にはノーザンブロッティングが使用されます。細胞を破壊してRNAを放出することができます。異なる細胞タイプからのRNAは、ゲル上の別々のレーンで実行できます。ゲルはサイズによって異なるRNAを広げます。これらのきちんとした平行したRNAの列により、研究者はどの細胞型がどのRNAをどれだけ持っているかを比較できます。この方法により、研究者は特定の疾患の細胞がこのRNAを多く持っているか、それとも少ないかを判断できます。ノーザンブロット法により、RNA産生レベルで疾患がどのように機能しているかが明らかになる場合があります。
サザンブロット
サザンブロッティングは、命名システムを開始したオリジナルのブロッティング技術です。エドウィン・サザンが発明しました。サザンブロットは、混合物中のDNAの量を検出するために使用されます。タンパク質やRNAと同様に、細胞が破壊されると細胞のDNAが放出されます。サザンブロッティングは、サイズによって異なる細胞タイプからDNAを分離します。各サンプルからのDNAは、きれいな平行レーンに広がります。 DNAの個々の断片は、そのDNAの断片にのみ結合するように設計された放射性プローブまたは蛍光プローブを使用して検出できます。放射性プローブからのエネルギー信号、または蛍光信号からの閃光は、研究者に各サンプルにそのDNAがどれだけあるかを伝えます。
その他のしみ
ウエスタン、ノーザン、サザンの3つの主要なブロッティング技術は、わずかに異なる分子を検出するためにさまざまな方法で修正されています。たとえば、ウエスタンブロット対サザンブロット。タンパク質とDNAをそれぞれ検出します。修正された各手法は通常、通常の方法で行われますが、異なる方法を使用して、平行レーンに広がっている分子を検出します。南西部のしみは、DNAに付着したタンパク質の分子を検出します。ノースウェスタンブロットは、RNAに付着したタンパク質の分子を検出します。ファーウェスタンブロットは、他のタンパク質に付着したタンパク質の分子を検出します。