バチルス発現システムの長所と短所

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著者: Randy Alexander
作成日: 28 4月 2021
更新日: 17 11月 2024
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今日、様々な発現系が開発されており、特に組換えタンパク質を取得するために、商業的に非常に確立されています。利用される発現システムには、哺乳動物および昆虫の培養、大腸菌および細菌が含まれます。細菌の発現は、使用されている顕著なシステムです。フェルディナンドコーンは1872年にバチルス属を初めて記述し、枯草菌、炭th菌、メガテリウム菌、バチルスなどのグラム陽性細菌種が多数含まれています。

枯草菌

枯草菌は、一般的に土壌に見られるグラム陽性菌であり、単一の膜しか含まないため、有機分子の分泌に理想的なフレームワークとなっています。枯草菌は、細胞外酵素を培地に直接分泌する能力があるため、タンパク質の生産にとって魅力的な宿主です。また、大きな排泄能力があります。枯草菌は、インターフェロン、成長ホルモン、ペプシノーゲン、表皮成長因子などの分泌される外来タンパク質の品質と量を改善するために使用されてきました。しかし、枯草菌は、分泌された外来タンパク質を分解する高レベルの細胞外プロテアーゼを産生および分泌します。また、バチルスには、B。subtilisシステムの幅広い適用を制限する、十分に調節された誘導性ベクターがありません。

炭ac菌

炭th菌は、土壌に生息するグラム陽性の胞子形成菌です。ヒトの宿主に侵入すると、急速に増殖し、炭v菌、トベミアと敗血症を伴う疾患を引き起こす可能性があります。炭ac菌の負の効果の例は、2001年に米国の郵便制度で実証されたように、生物戦での潜在的な使用でした。炭specifying菌の原因となるカプセルおよび毒性因子を特定する遺伝子は、2つのプラスミドpXO1およびpXO2とこれらの遺伝子の転写にあります栄養増殖中にレギュレータAtxAによってアクティブになります。炭an菌の研究は、最も確立された毒性因子である防御抗原(PA)で構成される炭ax毒素に関連する遺伝子の発現に主に焦点を合わせています。炭ac菌の防御抗原は、炭thr菌に対する現在のヒトワクチンの主要な防御免疫原です。

バチルスメガテリウム

Bacillus megateriumは、土壌で見られる最大の菌の1つです。多種多様な炭素供給で成長するため、多くの生態学的ニッチに見られます。 B. megaterium発現システムは、安定した高収量のタンパク質生産のための柔軟で扱いやすいツールを提供します。これにはいくつかの理由があります。まず、B。megateriumはアルカリプロテアーゼを持たないため、分解せずに外来タンパク質の優れたクローニングと発現が可能です。第二に、細菌はタンパク質を成長培地に容易に分泌し、第三に、細胞壁にエンドトキシンが見つかりません。パン産業で使用されるアミラーゼや抗生物質の製造に使用されるペニシリンアミダーゼなど、多様な酵素を生成します。

バチルス・ブレビス

Bacillus brevisは、異種タンパク質(構造の異なるタンパク質)の生産に使用されています。ブレビス菌についてはあまり研究されていませんが、大腸菌系で生産されると不溶性の可溶性タンパク質を生産することが知られています。また、培養および滅菌が容易な安全な宿主でもあります。その使用を制限する主な欠点は、タンパク質の低収量です。