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顕微鏡で低倍率から高倍率に変更すると、高倍率対物レンズが試料上を直接移動し、低倍率対物レンズが試料から離れるように回転します。この変更により、標本の倍率、光の強度、視野の面積、被写界深度、作動距離、解像度が変わります。レンズの品質が高い場合は、画像に焦点を合わせたままにしてください。
倍率の変更
低出力から高出力に変更すると、標本の倍率が大きくなります。画像が拡大される量は、接眼レンズまたは接眼レンズの倍率に対物レンズの倍率を掛けたものに等しくなります。通常、接眼レンズの倍率は10倍です。典型的なラボ品質の標準光学顕微鏡には、通常、4倍の低倍率から100倍の高倍率まで動作する4つの対物レンズがあります。 10倍の眼力により、標準の光学顕微鏡では、40倍から1000倍までの全体的な倍率範囲が得られます。
光の強度が低下する
倍率が高くなると、光の強度は低下します。領域ごとに一定の光量があり、領域の倍率を上げると、より小さな領域が表示されます。そのため、光が少なくなり、画像が暗くなります。画像の明るさは、倍率の2乗に反比例します。倍率が4倍になると、画像は16倍減光されます。
視野
顕微鏡で高倍率にすると、視野の面積が減少します。視野は対物レンズの倍率に反比例します。たとえば、視野の直径が10倍の倍率で1.78ミリメートルの場合、40倍の対物レンズの幅は4分の1、つまり約0.45ミリメートルになります。対象物の小さな領域が広がって眼の視野をカバーするため、標本は高倍率で大きく表示されます。
被写界深度
被写界深度は、焦点面の厚さの尺度です。倍率が大きくなると、被写界深度が小さくなります。たとえば、低倍率ではゾウリムシの全体を見ることができますが、倍率を上げると原生動物の表面が1つしか見えない場合があります。
作動距離
作動距離は、試料と対物レンズの間の距離です。倍率を上げると、作動距離が短くなります。高倍率の対物レンズは、焦点を合わせるために低倍率の対物レンズよりも標本にずっと近くなければなりません。作動距離は倍率に反比例します。
油浸
顕微鏡は、光を曲げることでオブジェクトの外観を拡大します。倍率が高いほど、光はより大きく曲げられます。ある時点で、光は大きく曲げられ、対物レンズを通過できません。その時点で(通常、標準的な実験用顕微鏡の場合は約100倍)、標本と対物レンズの間にオイルを一滴入れる必要があります。オイルは光を「曲げない」ようにして作動距離を広げ、高倍率での画像化を可能にします。