薄層クロマトグラフィーでRF値に影響する要因

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著者: Louise Ward
作成日: 6 2月 2021
更新日: 17 5月 2024
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薄層クロマトグラフィーでは、技術者が化学物質の混合物のスポットを吸収性材料の層でコーティングされた平らなプレートに置き、プレートの下部を溶媒に浸します。溶媒がプレートを上に移動すると、混合物中の化学物質が異なる速度で一緒に移動し、分離します。このテストでは、未知の物質の移動速度を既知の基準と比較することにより、混合物に含まれる化学物質を特定します。ただし、結果は多くの要因の影響を受ける可能性があります。

TL; DR(長すぎる;読まなかった)

薄層クロマトグラフィーの保持係数の値は、吸収剤、溶媒、クロマトグラフィープレート自体、アプリケーションテクニック、および溶媒とプレートの温度の影響を受けます。

保持要因

薄層クロマトグラフィー中の化学物質の保持係数は、溶媒の移動に応じてプレートをどれだけ上に移動するかの尺度です。化学物質の絶対的な動きは、溶媒の移動距離に依存するため、溶媒の動きの程度に対する保持係数の値を計算します。化学物質の保持係数は、化学物質がプレートに最初に塗布された場所から化学物質によって移動した垂直距離を、溶媒が移動した距離で除算したもので、同じ開始点から測定されます。

薄層クロマトグラフィープレート

薄層クロマトグラフィープレート自体は、特定の化学物質について得られる保持係数の値に影響を与える可能性があります。薄層クロマトグラフィープレートは、さまざまな吸収性固体でコーティングできます。最も頻繁にシリカまたはアルミナ。保持係数は、溶媒と比較した吸収剤に対する化学物質の相対的な親和性に基づいているため、吸収剤を変更すると保持係数が大きく変化する可能性があります。また、吸収剤の層の厚さと均一性は、特に手作りの場合、プレートごとに異なります。これらの要因は、化学物質の保持係数の値を変えることもあります。

溶媒の影響保持要因

溶媒は化学物質をプレートに運ぶため、使用される特定の溶媒も化学物質の保持係数値に大きな影響を与えます。特定の化学物質に対してより強い相互作用を有する溶媒は、吸収層に対する化学物質の親和性をより簡単に克服し、一定時間内にその化学物質をさらに移動させます。溶媒の混合物は、各溶媒の割合に応じて異なる効果を持つこともあります。

その他の要因

場合によっては、保持係数に影響を与える可能性のある他のいくつかの要因があります。溶媒とプレートの温度はわずかに変化する場合があります。たとえば、溶媒は高温で輸送している化学物質をよりよく溶解できる場合が多いためです。サンプルをプレートに適用する際の技術者の手法も、保持係数を変更する場合があります。サンプルの量が多すぎると、拡散した化学物質の大きなバンドがプレート上を移動し、化学物質が輸送された距離を正確に測定することが難しくなります。