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大腸菌、大腸菌は、哺乳類の下部腸で成長する細菌です。この細菌は1800年代後半に初めて発見されました。それ以来、科学研究で長い歴史があります。分子遺伝学で最も広く使用されている生物です。大腸菌が科学研究で一般的に使用される理由の一部は、実験室での増殖が容易であることです。大腸菌の増殖を容易にする要因は、その単純な栄養ニーズ、速い増殖速度、および中程度のメンテナンス要件です。
ブンゼンバーナーの炎に入れて、接種ループを滅菌します。ループの下半分を炎が赤く光るまで通過させます。
ループを冷却します。プレート上の滅菌寒天に触れて、冷却したことを確認できます。ループをテーブルに置いたり、滅菌した寒天または目的の培養物以外のものに接触させないでください。
E. coli培養液にループを浸し、それを取り除きます。
寒天プレートを開き、寒天の1つのセクションの表面上でループを前後に静かに滑らせます。ループで寒天を傷つけないように注意してください。寒天は、大腸菌が成長するために必要な栄養素を提供します。
ループを再びブンゼンバーナーの炎に入れて滅菌します。ループロッドが冷めたら、プレートの滅菌部分に触れて、それが冷たくなっていることを確認し、最初のストリークでループを滑らせて、2番目のストリークを作成します。この2番目のストリークは、1番目のストリークの希釈バージョンです。寒天プレートのいくつかのセクションがすべるまで、この滅菌と滑空のプロセスを繰り返します。これを行う理由は、後で単一のクローンコロニーから選択できるようにするためです。これにより、個々のコロニーがある少なくとも1つのセクションがあることを確認できます-集中しすぎない(成長が大きくなり、単一のコロニーから選ぶことができません)希釈しすぎない(コロニーを与えない) 。
作業エリアに置く前に、最後にもう一度炎の中でループを滅菌します。
トップを寒天プレートに戻します。プレートを逆さまにして、摂氏37度(華氏98.6度)に設定されたインキュベーターに入れます。この理想的な培養温度は、大腸菌が存在する人体の温度をシミュレートします。 24〜48時間以内に、大腸菌の目に見えるコロニーが寒天プレートに現れます。