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土壌から細菌を分離することは、多くの微生物学実験における重要な最初のステップです。それらが分離されたら、バクテリアをさらに分析して、種や土壌環境での機能などを判断できます。ほんのわずかな量の土壌でさえ数百万のバクテリアを含むことがあるため、サンプルからバクテリアを分離する前に土壌サンプルを希釈する必要があります。
100 mlを測定します。メスシリンダーに蒸留水を入れ、滅菌ボトルに加えます。
土壌サンプル1 gを計量し、蒸留水のボトルに追加します。ボトルにしっかりと蓋をし、振って溶液を完全に混合します。
滅菌試験管に「10 ^ -3」、「10 ^ -4」、「10 ^ -5」、および「10 ^ -6」のラベルを付けます。ピペットの1つを使用して、各チューブに9 mlの蒸留水を加えます。
新しいピペットを使用して、ボトル内の溶液1 mlを「10 ^ -3」というラベルの付いたチューブに移します。チューブにキャップをし、溶液がよく混ざるまで静かに回します。
「10 ^ -3」テストチューブの溶液1 mlを新しいピペットで「10 ^ -4」チューブに移します。 「10 ^ -4」チューブに蓋をして、渦を巻いて混ぜます。この方法を繰り返して、溶液を「10 ^ -4」チューブから「10 ^ -5」チューブに移し、次に「10 ^ -5」チューブから「10 ^ -6」チューブに移します。
「10 ^ -4」、「10 ^ -5」、および「10 ^ -6」チューブからそれぞれ3つのサンプルをめっきします。新しいピペットを使用して、チューブから1 mlの溶液をペトリ皿に移します。プレートに約15 mlの栄養寒天を加えます。蓋をプレートに置き、寒天がプレートの底を覆うように静かに旋回します。
新しいピペットを使用して、ペトリ皿に蒸留水1 mlを入れてコントロールプレートを作成します。寒天を追加します。蓋をして、プレートを回します。
寒天が固まるまでペトリ皿を直立したままにします。次に、プレートを反転し、インキュベーター内または室温で24時間から5日間までインキュベートします。
インキュベーション時間の望ましい量の後にインキュベーターからプレートを取り外します。約30〜300コロニーを含むプレート上の細菌コロニーを数えます。同じコロニーを2回カウントしないようにするために、永久マーカーを使用して、既にカウントしたコロニーをマークします。
各プレートの土壌溶液の希釈（「10 ^ -4」、「10 ^ -5」、または「10 ^ -6」）でカウントしたコロニー数を割ります。各可算プレートからの結果を平均することにより、土壌の元のグラム内の培養可能な細菌の数を見つけます。