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紫外光（UV）の吸光度を測定して、RNAサンプルを定量します。ナノドロップ分光光度計では、サンプルを1〜2マイクロリットルしか使用せず、回収できます。他の分光光度計では、より大きなサンプルが必要です。 1 cmの光路における260 nmのUV波長でのヌクレオチドの吸光係数は20です。この吸光係数に基づいて、同じ条件下での40 µg / ml RNAの吸光度は1です。この情報を使用して、RNAサンプルの濃度を計算できます。
必要に応じて、サンプルを希釈します。マイクロキュベットの標準的な希釈は1:40です。 2µLのRNAサンプルを78µLの滅菌水に加えて希釈します。
特定の分光光度計のプロトコルに従って、ブランクを使用して機械を校正し、260nmのUV波長でサンプルの光学密度を決定します。
サンプルの吸光度に希釈係数を掛け、40μgRNA / mLを掛けます。方程式は次のようになります。「RNA濃度（µg / ml）=（OD260）x（希釈係数）x（40µg RNA / ml）/（1 OD260単位）」（Hofstra.edu）例：サンプルを希釈した場合1:40で吸光度の読み取り値が0.08の場合、0.08 x 40 x 40 = 128 µg / ml = 0.13 µg /μLを乗算します
280nm UV波長で別の吸光度を読み取って、サンプルの純度を計算します。 OD 260 / OD 280の比率は、サンプルがタンパク質またはフェノールで汚染されているかどうか、およびどのレベルで汚染されているかを示します。 1.8〜2.0の結果は、高品質のRNAを示しています。