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微生物学者は、顕微鏡を使用して藻類、原生動物、バクテリア、真菌、ウイルスなどの微生物の特性を研究します。原生動物や酵母細胞などの一部の生物はウェットマウントを使用して簡単に観察できますが、細菌細胞は染色が必要です。科学者は、グラム染色、抗酸性染色、蛍光染色などのいくつかの方法を開発して、細菌細胞と細胞構造をよりよく視覚化しました。このような染色法を使用すると、細菌の分類に役立つ構造的特徴を特定できます。
より良い視覚化
細菌生物は非常に小さいため、それらのほとんどは1000倍の倍率の顕微鏡でのみ見ることができます。ただし、単にサイズを拡大しても十分な透明度は得られないため、観察前に細菌を染色して、視覚化に必要な透明度を確保する必要があります。
識別と分類
細菌の種類を区別するための細菌の染色は、示差染色として知られています。グラム染色は、細胞壁の含有量に基づいて細菌を区別する差別的な染色の1つです。この方法では、細菌細胞はクリスタルバイオレット染色と反応して、バイオレット色を取り込みます。脱染剤を加えると、一部の細菌細胞は色を失いますが、他の細胞はそうではありません。サフラニン染色を加えると、脱色された細胞は染色を吸収して赤く見えますが、色を失わなかった細菌細胞は紫のままです。赤色を呈する細菌細胞はグラム陰性生物と呼ばれ、色を呈さない細菌細胞はグラム陽性生物として分類されます。グラム染色は、感染症に関与する細菌の初期同定のための迅速な方法を提供します。同様に、抗酸性染色法は、結核菌などのマイコバクテリアと呼ばれる細菌のクラスに属する生物を特異的に識別するのに役立ちます。
生存率の検出
細菌培養標本では、多くの場合、生きている細菌細胞の存在を検出することが重要です。蛍光染色などの染色法は、培養細胞が生存しているかどうかを識別するのに役立ちます。生きている細菌は、5-シアノ-2,3-ジトリルテトラゾリウムクロリド(CTC)染色を赤色蛍光を示す色素に変換する能力を持っています。したがって、CTCで染色された培養物がそのような蛍光を発するとき、それは生菌の存在を示しています。ヨウ化プロピジウムは、損傷した膜を持つ非生体細胞にのみ作用する染色剤であるため、死んだ細菌細胞の特定に役立ちます。
細胞構造の同定
染色は、いくつかの細胞構造を明確に視覚化する方法を提供します。たとえば、Fuelgen染色法では細菌細胞内の核を特定できますが、Albertの染色法は異染性顆粒の視覚化に役立ちます。同様に、銀含浸技術はスピロヘータの識別を可能にします。べん毛は、リュウの染みで染められていると簡単に観察できます。マラカイトグリーン染色は、細菌の胞子を識別するのに役立ちます。